Antibody이제는 Recombinant antibody 입니다!

2022-05-13
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높은 항체 특이성 및 재현성, 향상된 민감도, 안정적인 공급, 이 모든 것을 만족시키는

Recombinant antibody를 만나보세요


Recombinant monoclonal antibody

Abcam에서는 항체를 코딩하는 유전자를 고수율의 expression vector에 cloning한 다음, expression host에 도입하여 Recombinant antibod를 생산합됩니다. Recombinant monoclonal antibody는 동일한 epitope을 target하는 동일한 antibody chain으로 구성되어 있으며, 이는 재현성을 높이고 보장된 공급, 향상된 민감도, 확인된 특이성과 같은 이점을 제공합니다. 


재조합 방식으로 생산된 antibody의 장점

재조합 방식으로 생산된 항체는 다른 방법으로 제조된 항체의 한계 (예: 생산된 항체에 약간의 변형을 초래할 수 있는 genetic drift 등)를 극복할 수 있습니다. Toxin, nucleotide, membrane-bound protein과 같은 어려운 target에 대한 항체는 생체 모델로 매번 만들 수 없습니다. 재조합 방식으로 생산된 항체는 다음과 같은 장점을 가집니다.

  • Batch 간 최고 수준의 일관성 및 높은 친화도
  • 향상된 민감도 및 확인된 특이성
  • 쉬워진 생산량 조절 및 지속적인 공급
  • High throughput in vitro 제조


Batch 간 최고 수준의 일관성

Recombinant antibody 생산은 고유한 유전자 세트를 사용하기 때문에 통제 가능하고 신뢰할 수 있습니다. 이를 통해 batch 간 일관성이 높은 항체를 만들 수 있으며, 실험자의 연구 또는 약물 개발 연구에 요구되는 재현성 높은 결과를 얻을 수 있습니다.


Figure 1. 5가지 batch의 Recombinant Anti-PD-L1 antibody [28-8] (ab205921)를 이용하여 Human FFPE placenta 조직에서의 PD-L1 localization 재현성을 확인한 결과. Biocare Decloaking Device와 Universal HIER antigen retrieval reagent (10X) (ab208572)를 이용하여 IHC 실험이 수행되었습니다. ab205921을 4°C, overnight incubation 후 goat anti-rabbit 2차 항체와 Rabbit specific IHC polymer detection kit HRP/DAB (ab209101)를 처리했습니다. Chromogen으로 DAB이 사용되었고  Hematoxylin 대조염색을 함께 진행했습니다.


Batch 간 일관된 높은 친화도

KD value는 항체 친화도 (affinity)를 정량적으로 나타내는 지표입니다. KD value가 낮을수록, 항체의 affinity는 높아집니다. Recombinant anti-PD-L1 antibody의 KD value 분석 결과는 5가지 다른 batch 간의 affinity가 높게 유지됨을 보여줍니다.

Table 1. Recombinant anti-PD-L1 antibody [28-8] (ab205921) 5가지 batch의 KD value 분석 결과. KD value에 대한 보다 자세한 내용은 abcam의 KD guide (링크)를 참고하세요.

AntibodyKD (M)
PD-L1_batch 14.74E-11
PD-L1_batch 23.83E-11
PD-L1_batch 32.04E-11
PD-L1_batch 42.40E-11
PD-L1_batch 52.13E-11


향상된 민감도 및 확인된 특이성

원하는 clone 선별 과정이 hybridoma와 recombinant cloning 단계 모두에서 이루어지기 때문에, 가장 선호되는 품질의 항체를 선별할 수 있습니다. 또한 결과에 대한 확신을 더하기 위해, knock-out validation을 포함한 광범위한 검증 방법을 사용하여 recombinant antibody의 특이성을 보장하고 있습니다.

평균적으로 abcam의 recombinant RabMAb antibody는 피코몰 (10-10-10-12) 범위의 KD value를 가지며, 이는 매우 높은 친화도로 간주됩니다. 높은 친화도를 가진 항체는 항원에 강하게 결합하고, 낮은 친화도를 가진 항체에 비해 어려운 조건에서 이 결합을 더욱 잘 유지하기 때문에 분석에서 더 큰 민감도를 보입니다.

다음의 예시는 recombinant antibody와 다른 항체 유형 간 특이성의 차이를 보여줍니다.


 

Figure 2. Knock-out과 wild-type sample에서 WB으로 두 가지의 TLE 1 항체를 비교한 결과

왼쪽: Recombinant Anti-TLE 1 antibody [EPR9386(2)] (ab183742)

오른쪽: Monoclonal Anti-TLE 1 antibody [OTI1F5]








 

 

Figure 3. Knock-out과 wild-type sample에서 WB으로 두 가지의 GRIM19 항체를 비교한 결과 

왼쪽: Recombinant Anti-GRIM19 antibody [EPR4471(2)] (ab109017)

오른쪽: Monoclonal Anti-GRIM19 antibody [6E1BH7] 









쉬워진 생산량 조절 및 지속적인 공급

재조합 방식의 생산은 항체 유전자를 expression vector에 cloning함으로써 진행됩니다. 즉, 어떤 생산 규모에서도 항체 발현을 수행할 수 있으며, 항체의 장기적인 공급을 보장할 수 있습니다. 따라서 모든 규모의 프로젝트를 안심하고 진행할 수 있습니다. (예: 재조합 항체를 장기간 연구에 대한 훌륭한 솔루션으로 활용하거나 동일한 항체를 다양한 샘플에 적용 가능)


High throughput in vitro 제조

항체 생산 유전자가 한 번 분리되면, high-throughput in vitro 생산이 구현될 수 있습니다. Abcam의 phage display 기술을 이용하여 생산된 항체의 경우, 항체 유전자 역시 animal-free 방식으로 분리될 수 있습니다.


Recombinant multiclonal antibody

Recombinant multiclonal antibody는 동일한 항원에 있는 서로 다른 epitope을 인식하도록 설계된, 신중하게 선택된 개별 recombinant monoclonal antibody들의 혼합물입니다.

Recombinant multiclonal antibody는 전통적으로 polyclonal antibody가 사용되는 실험 방법에 이상적으로 사용될 수 있으며, 오직 재조합 항체에서만 가능한 특이성과 재현성을 제공할 수 있습니다.


장기간의 재현성 보장

각각의 Recombinant multiclonal antibody를 구성하는 antibody의 혼합물은 배치 간 주의 깊게 제어되며 일관성이 있습니다. 또한 혼합물에 포함된 각각의 recombinant monoclonal antibody는 원하는 특성을 가지는 antibody를 인코딩하도록 정의된 유전자 세트로부터 개발되었습니다. 이러한 특성은 배치 간 일관성을 보장하며 실험에 필요한 장기적인 재현성을 제공합니다.


Polyclonal antibody에 대한 강력한 대체제

Recombinant multiclonal antibody는 동일한 target 단백질의 여러 epitope에 결합하기 때문에 우수한 sensitivity를 제공합니다. 저농도의 target을 분석하거나 한 번에 multiple post-translational modification을 검출할 수 있는 시약이 필요한 경우에 적합합니다.


* Recombinant multiclonal antibody에 대한 보다 자세한 내용은 [Polyclonal 항체를 쓰시나요? 이제는 Recombinant multiclonal antibody!] 게시물 (링크) 을 참고해 주세요.



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