In vitro는 물론 in vivo 유전체 편집 실험을 할 수 있는
VectorBuilder의 CRISPR 제품 및 서비스를 확인해 보세요!
- Transfection 또는 transduction에 바로 사용할 수 있는 고객 맞춤형 제품을 제공합니다.
- CRISPR 벡터를 포함하여, plasmid, virus, RNA와 같이 다양한 형태로 제공 가능합니다.
- Transfection이 어려운 세포들에 효율적으로 CIRSPR/Cas9을 전달할 수 있도록 AAV, Lentivirus, Adenovirus 유형으로 패키징 가능합니다.
- 제작 서비스는 물론 검증된 whole genome dual-gDNA knockout library 또한 이용해 보실 수 있습니다.
1. 맞춤형 CRISPR 벡터
- CRISPR 기반의 유전체 편집을 위해서는 Cas9과 타겟 부위에 결합하는 gRNA의 동시 발현이 요구됩니다.
- VectorBuilder의 직관적인 벡터 디자인 플랫폼을 이용하여 Cas9과 고객의 gRNA를 여러 가지 다양한 방법으로 디자인 가능합니다.
- 30가지 이상의 벡터 backbone (non-viral, viral 또는 transposon)와 다양한 벡터 구성 요소들 (promoters, Cas9 variants 등)을 조합하여 벡터를 제작하실 수 있습니다.
- 일반 plasmid, 렌티바이러스, AAV, 아데노바이러스, 또는 PiggyBac backbone을 사용하여 Cas9과 gRNA를 단일 벡터 또는 이중 벡터 시스템으로 제공합니다.
- HDR을 이용해 point mutation이나 큰 서열을 knockin하는데 가이드 DNA template로 사용될 수 있는 유전자 타겟팅 donor 벡터도 제작 가능합니다.
- 타겟 유전자 내부의 부위를 이용하여 전사를 활성화하거나 억제하는 CRISPRa 및 CRISPRi 벡터도 제공합니다.
- CRISPR 벡터를 주문하실 때 downstream 서비스로서 plasmid DNA 정제, RNA 정제 및 바이러스 패키징 등의 서비스 또한 선택 가능합니다.
2. CRISPR 바이러스
- VectorBuilder는 transfection이 어려운 세포들에 매우 높은 효율의 CRISPR 타겟팅이 가능하도록 Lentivirus, AAV 및 Adenovirus 패키징 서비스를 제공합니다.
- Titer, 순도, viability, 일관성이 크게 향상된 바이러스 패키징을 통해 최적화된 바이러스 패키징 제품을 제공합니다.
- VectorBuilder의 벡터 제작 서비스에 최적화된 바이러스패키징 기술 활용으로 프리미엄급 바이러스 패키징을 제공합니다.
바이러스 별 패키징의 scale, titer 등 정보
1) Lentivirus
Scale | Application | Typical Titer | Minimum Titer | Volume |
Pilot | Cell culture | > 4x10^8 TU/ml | > 10^8 TU/ml | 250 ul (10x25 ul) |
Medium | > 3x10^8 TU/ml | 1 ml (10x100 ul) |
Large | > 2x10^9 TU/ml | > 10^9 TU/ml | 1 ml (10x100 ul) |
Ultra-purified medium | Cell culture & in vivo | > 2x10^9 TU/ml | > 10^9 TU/ml | 500 ul (10x50 ul) |
Ultra-purified large | 1 ml (10x100 ul) |
* TU: Transduction units (also known as infectious units)
** Minimum Titer는 보증됩니다.
*** Non-ultra-purified scale의 경우 무상으로 contorl virus가 제공되며, ultra-purified scale의 경우 유상으로 구매 가능합니다.
2) AAV
Scale | Application | Typical Titer | Minimum Titer | Volume |
Pilot | Cell culture | > 10^12 GC/ml | > 2x10^11 GC/ml | 250 ul (10x25 ul) |
Medium | 1 ml (10x100 ul) |
Large | > 5x10^12 GC/ml | > 2x10^12 GC/ml | 1 ml (10x100 ul) |
Ultra-purified pilot | Cell culture & in vivo | > 2x10^13 GC/ml | > 10^13 GC/ml | 100 ul (4x25 ul) |
Ultra-purified medium | 500 ul (10x50 ul) |
Ultra-purified large | 1 ml (10x100 ul) |
Ultra-purified large 5 | 5 ml (10x500 ul) |
Ultra-purified 10 | 10 ml (10x1 ml) |
* GC: Genome copies
** Minimum Titer는 보증됩니다.
*** AAV serotype 3, 4, 6, 6.2는 다른 serotype에 비해 titer가 낮습니다. 해당 serotype은 minimum titer의 50%만 보증합니다.
*** Non-ultra-purified scale의 경우 무상으로 contorl virus가 제공되며, ultra-purified scale의 경우 유상으로 구매 가능합니다.
3) Adenovirus
Scale | Application | Typical Titer | Minimum Titer | Volume |
Pilot | Cell culture | > 2x10^10 IFU/ml | > 10^10 IFU/ml | 250 ul (10x25 ul) |
Medium | 1 ml (10x100 ul) |
Large | > 2x10^11 IFU/ml | > 10^11 IFU/ml | 1 ml (10x100 ul) |
Ultra-purified medium | Cell culture & in vivo | > 2x10^12 VP/ml | > 2x10^12 VP/ml | 500 ul (10x50 ul) |
Ultra-purified large | 1 ml (10x100 ul) |
* IFU: Infectious units
** VP: Virus particles
*** Minimum Titer는 보증됩니다.
**** Non-ultra-purified scale의 경우 무상으로 contorl virus가 제공되며, ultra-purified scale의 경우 유상으로 구매 가능합니다.
3. Cas9 mRNA 및 gDNA를 위한 RNA 제조
- 원하시는 타겟 부위에 대하여 디자인된 CRISPR 구성 요소들을 RNA 형태로 포유류 세포에 용이하게 전달할 수 있는 서비스를 제공합니다.
- Cas9 mRNA 및 gRNA를 바로 transfection이나 micro injection에 사용할 수 있는 상태로 제작하여 전달해 드립니다.
- Cas9 mRNA는 야생형 hCas9 mRNA와 Cas9 (D10A) mRNA로 제공합니다.
- CRISPR library design(CLD)에 활용된 알고리즘으로 특이성 점수를 계산하고 일련의 경험적 규칙을 적용하여 최적의 gRNA를 디자인합니다.
CRISPR RNA 제작 기간
| Reagent | Concentration & Volume | Turnaround |
hCas9 mRNA
| > 500 ng/ul, 25 ul, nuclease-free water, sterile | 2 - 4 days |
| Cas9 (D10A) mRNA |
| Custom gRNA* |
4. 정밀한 유전체 편집을 위한 donor DNA
- VectorBuilder는 CRISPR 절단 부위의 정교한 DNA 서열 변화를 도입하기 위하여 HDR에 의한 RNA repair를 가이드하는 donor DNA template를 ssODN (single-stranded oligodeoxynucleotides) 또는 plasmid를 선형화하여 만든 dsDNA 로 제공해드립니다.
- 도입될 수 있는 서열 변화는 point mutation이나 작거나 큰 DNA 서열의 knockin을 포함합니다.
- ssODN은 작은 tag이나 제한효소 부위와 같은 60 bp 미만의 짧은 DNA 서열을 삽입하는데 사용되며, dsDNA donor는 형광 tag이나 다른 reporter와 같이 4-5 kb까지의 더 큰 서열의 targeted knockin을 위하여 사용됩니다.
| Reagent | Turnaround |
| ssODN (normally 120-200 nt) | 2-3 weeks |
In vitro는 물론 in vivo 유전체 편집 실험을 할 수 있는
VectorBuilder의 CRISPR 제품 및 서비스를 확인해 보세요!
- Transfection 또는 transduction에 바로 사용할 수 있는 고객 맞춤형 제품을 제공합니다.
- CRISPR 벡터를 포함하여, plasmid, virus, RNA와 같이 다양한 형태로 제공 가능합니다.
- Transfection이 어려운 세포들에 효율적으로 CIRSPR/Cas9을 전달할 수 있도록 AAV, Lentivirus, Adenovirus 유형으로 패키징 가능합니다.
- 제작 서비스는 물론 검증된 whole genome dual-gDNA knockout library 또한 이용해 보실 수 있습니다.
1. 맞춤형 CRISPR 벡터
- CRISPR 기반의 유전체 편집을 위해서는 Cas9과 타겟 부위에 결합하는 gRNA의 동시 발현이 요구됩니다.
- VectorBuilder의 직관적인 벡터 디자인 플랫폼을 이용하여 Cas9과 고객의 gRNA를 여러 가지 다양한 방법으로 디자인 가능합니다.
- 30가지 이상의 벡터 backbone (non-viral, viral 또는 transposon)와 다양한 벡터 구성 요소들 (promoters, Cas9 variants 등)을 조합하여 벡터를 제작하실 수 있습니다.
- 일반 plasmid, 렌티바이러스, AAV, 아데노바이러스, 또는 PiggyBac backbone을 사용하여 Cas9과 gRNA를 단일 벡터 또는 이중 벡터 시스템으로 제공합니다.
- HDR을 이용해 point mutation이나 큰 서열을 knockin하는데 가이드 DNA template로 사용될 수 있는 유전자 타겟팅 donor 벡터도 제작 가능합니다.
- 타겟 유전자 내부의 부위를 이용하여 전사를 활성화하거나 억제하는 CRISPRa 및 CRISPRi 벡터도 제공합니다.
- CRISPR 벡터를 주문하실 때 downstream 서비스로서 plasmid DNA 정제, RNA 정제 및 바이러스 패키징 등의 서비스 또한 선택 가능합니다.
2. CRISPR 바이러스
- VectorBuilder는 transfection이 어려운 세포들에 매우 높은 효율의 CRISPR 타겟팅이 가능하도록 Lentivirus, AAV 및 Adenovirus 패키징 서비스를 제공합니다.
- Titer, 순도, viability, 일관성이 크게 향상된 바이러스 패키징을 통해 최적화된 바이러스 패키징 제품을 제공합니다.
- VectorBuilder의 벡터 제작 서비스에 최적화된 바이러스패키징 기술 활용으로 프리미엄급 바이러스 패키징을 제공합니다.
바이러스 별 패키징의 scale, titer 등 정보
1) Lentivirus
* TU: Transduction units (also known as infectious units)
** Minimum Titer는 보증됩니다.
*** Non-ultra-purified scale의 경우 무상으로 contorl virus가 제공되며, ultra-purified scale의 경우 유상으로 구매 가능합니다.
2) AAV
* GC: Genome copies
** Minimum Titer는 보증됩니다.
*** AAV serotype 3, 4, 6, 6.2는 다른 serotype에 비해 titer가 낮습니다. 해당 serotype은 minimum titer의 50%만 보증합니다.
*** Non-ultra-purified scale의 경우 무상으로 contorl virus가 제공되며, ultra-purified scale의 경우 유상으로 구매 가능합니다.
3) Adenovirus
* IFU: Infectious units
** VP: Virus particles
*** Minimum Titer는 보증됩니다.
**** Non-ultra-purified scale의 경우 무상으로 contorl virus가 제공되며, ultra-purified scale의 경우 유상으로 구매 가능합니다.
3. Cas9 mRNA 및 gDNA를 위한 RNA 제조
- 원하시는 타겟 부위에 대하여 디자인된 CRISPR 구성 요소들을 RNA 형태로 포유류 세포에 용이하게 전달할 수 있는 서비스를 제공합니다.
- Cas9 mRNA 및 gRNA를 바로 transfection이나 micro injection에 사용할 수 있는 상태로 제작하여 전달해 드립니다.
- Cas9 mRNA는 야생형 hCas9 mRNA와 Cas9 (D10A) mRNA로 제공합니다.
- CRISPR library design(CLD)에 활용된 알고리즘으로 특이성 점수를 계산하고 일련의 경험적 규칙을 적용하여 최적의 gRNA를 디자인합니다.
CRISPR RNA 제작 기간
4. 정밀한 유전체 편집을 위한 donor DNA
- VectorBuilder는 CRISPR 절단 부위의 정교한 DNA 서열 변화를 도입하기 위하여 HDR에 의한 RNA repair를 가이드하는 donor DNA template를 ssODN (single-stranded oligodeoxynucleotides) 또는 plasmid를 선형화하여 만든 dsDNA 로 제공해드립니다.
- 도입될 수 있는 서열 변화는 point mutation이나 작거나 큰 DNA 서열의 knockin을 포함합니다.
- ssODN은 작은 tag이나 제한효소 부위와 같은 60 bp 미만의 짧은 DNA 서열을 삽입하는데 사용되며, dsDNA donor는 형광 tag이나 다른 reporter와 같이 4-5 kb까지의 더 큰 서열의 targeted knockin을 위하여 사용됩니다.