Abcam쉽고 빠른 abcam의 HRP Conjugation kit를 소개합니다.

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HRP와 IgG 항체를 간단하고 빠르게 conjugation 시킬 수 있는 제품을 소개합니다. (For research use only)


1. 제품의 특징

1.  HRP conjugation kit는 1차 아민 그룹(ex: 라이신)을 표적으로 하여 HRP로 항체를 공유결합으로 라벨링하여 간단하고 빠르게 실험하실 수 있습니다.

2. Hands on time은 단 30초이며, 항체 손실 없이 3시간 30분 이내에 conjugation 된 항체를 준비할 수 있습니다.

3. 항체를 conjugation 하기 위해서는 적절한 buffer와 정제된 항체가 필요합니다. (아래표에서 확인 가능합니다.)

4. abcam은 항체 라벨링에 적합한 많은 종류의 carrier free 항체를 제공합니다. Conjugation을 바로 할 수 있는 abcam의 항체는 BSA, sodium azide, glycerol 이 들어있지 않은 정제된 항체이며 최적농도 1 mg/ml로 공급됩니다.

Carrier free 안티바디 자세히 알아보기


Conjugation 하려는 항체가 호환되지 않는 버퍼로 제공되는 경우 abcam의 항체 정제 kit 및 농축 kit를 사용하여 적절한 농도와 버퍼로 만들 수 있습니다.

Purification & Conjugation kit 알아보기


2. 제품은 사이즈별로 다양하게 판매되고 있습니다. 

Item 3 x 10 µg 100 µg 3 x 100 µg 1 mg5 x 1 mg5 mg
HRP mix 3 vials1 vial 3 vials1 vial 5 vials1 vial 
Modifier reagent 1 vial1 vial 1 vial 1 vial 1 vial1 vial 
Quencher reagent 1 vial1 vial 1 vial 1 vial 1 vial1 vial 


3. Conjugation시 고려야해 하는 항체의 버퍼 

호환되는 버퍼 및 항체 

Purified antibodyYes
Antibody concentration0.5-4 mg/mL
50mM / 0.6% Tris1Yes
pH6.5-8.5
Amine free buffer (e.g. MES, MOPS, HEPES, PBS)Yes
Potassium phosphateYes
Non-buffering salts (e.g. sodium chloride) Yes
0.1% BSAYes
Chelating agents (e.g. EDTA)Yes
50% Glycerol Yes
0.1% sodium azide2Yes
Sodium chlorideYes
Sodium citrateYes
EDTAYes
TrehaloseYes
SugarsYes
Gelatin<0.1%
Borate bufferYes

Tris buffered saline is almost always ≤ 50 mM / 0.6%
2 Sodium azide irreversibly inhibits HRP; antibodies with azide should be purified before using the HRP conjugation kit.


호환되지 않는 버퍼 및 항체 

Antibody in ascites fluid, serum, hybridoma or tissue culture mediaNo
Thiomerosal No
ProclinNo
GlycineNo
ArginineNo
GlutathioneNo
DTTNo
MerthiolateNo
Sodium AzideNo


4. Conjugation 시 필요한 항체의 양과 볼륨

Vial
Size
Lowest Amount of AntibodyRecommended Amount of Antibody
(1:4 Antibody:HRP)
Maximum Amount of Antibody
(1:1 Antibody:HRP)
Fixed Volume of Antibody
10 ugDown to 5 µg at 0.5 mg/mLOptimally 10 µg at 1 mg/mLUp to 40 µg at 4 mg/mLFixed 10 µL
100 ugDown to 50 µg at 0.5 mg/mLOptimally 100 µg at 1 mg/mLUp to 400 µg at 4 mg/mLFixed 100 µL
1 mgDown to 500 µg at 0.5 mg/mLOptimally 1,000 µg at 1 mg/mLUp to 4,000 µg at 4 mg/mL Fixed 1,000 µL
5 mgDown to 2500 µg at 0.5 mg/mLOptimally 5,000 µg at 1 mg/mLUp to 20,,000 µg at 4 mg/mLFixed 5,000 µL

  - 표시된 고정 볼륨을 사용하는 것이 중요합니다. 반응 부피를 수정하면 conjugated 항체의 품질이 저하될 수 있습니다.

  - 항체는 milli-Q 물이나 PBS를 사용하여 희석할 수 있습니다.

  - 최적의 conjugated 항체는 일반적으로 권장되는 양의 항체를 사용하여 생성되지만 제공된 범위 내에서 다른 양의 항체를 사용하여도 conjugation이 가능합니다.

  - 권장량보다 적은 양의 항체를 추가하면 conjugation 후 label이 결합되지 않을 수 있습니다. 이 분리된 label은 quencher에 의해 비활성화되고 하고자 하는 실험(application)의 첫 번째 세척 단계에서 제거됩니다.


5. 실험 Protocol  

사용하기 전에 모든 재료와 준비된 시약을 실온으로 Equilibration 합니다.

1. 항체의 10 μL에 1 μL의 Modifier reagent을 추가하고 부드럽게 섞습니다.

2. HRP Conjugation Mix 바이알에서 캡을 제거하고 항체 샘플(Modifier 시약이 추가된)을 동결건조된 물질에 직접 파이펫으로 옮깁니다. 파이펫을 사용하여 액체를 한 번 또는 두 번 부드럽게 섞어줍니다.

3. 바이알의 캡을 닫고, 실온(20-25°C)의 dark room에서 3시간 동안 그대로 두십시오. Overnight과 같은 더 긴 incubation도 가능합니다.

4. 3시간(또는 그 이상) 동안 incubation한 후, 사용된 항체 10 μL마다 1 μL의 Quencher 시약을 추가하고 부드럽게 섞습니다. Conjugation된 항체는 30분 후에 사용할 수 있습니다. 별도의 정제가 필요하지 않습니다.


6. Ordering Information

제품명
Cat no
사이즈
HRP Conjugation Kit - Lightning-Link®
ab102890
3 x 10 ug
100 ug
1 mg
5 x 1 mg
1 x 5 mg
HRP Antibody Conjugation Check Kit
ab236555
30 tests
Biotinylation Kit / Biotin Conjugation Kit (Fast, Type A) - Lightning-Link®
ab201795
3 x 10 ug
3 x 100 ug
100 ug
1 mg
Biotinylation Kit / Biotin Conjugation Kit (Fast, Type B) - Lightning-Link®
ab201796
3 x 10 ug
3 x 100 ug
100 ug
1 mg
Antibody Biotinylation Check Kit
ab270030
30 tests


제품문의 Tel. 031-728-3233~4       Email. technical@dawinbio.com   카카오톡 플러스친구 ID: abcam 


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