단백질 분석 시약Native PAGE 관련 신제품을 소개합니다!

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Native PAGE Reagent Series



Protein Extraction Kit - EzProteoLysis Native


▶ 단백질의 기능·활성을 손상시키지 않는 추출 시약 kit

▶ Protease Inhibitor와 Phosphatase Inhibitor 포함

▶ 세포에 첨가하여 냉각 상태로 두기만 하면 추출 가능

▶ 다량체 및 고분자 단백질 추출에 최적


▶ EzProteoLysis Native 사용법

: EzProteoLysis Native 1 ml, Protease Inhibitor 10 ul, Phosphatase Inhibitor 10 ul를 부드럽게 혼합하고 얼음 또는 4℃ block incubator로 냉각

■ 접착성 세포

1) 세포를 cold-PBS로 2-3회 세척

2) EzProteoLysis Native 용액 1 ml을 첨가하고 차가운 상태에서 15분 동안 반응

3) 세포와 EzProteoLysis Native 용액을 e-tube로 회수

4) 14,000xg에서 5-15분 간 원심분리 후 상층액 (단백질 추출)을 회수, 1차 보관: 4℃ / 장기 보관: -80℃  

■ 비접착성 세포

1) 세포를 200-500xg로 원심분리 후 상층액 제거

2) 세포를 cold-PBS로 세척 후, 다시 200-500xg로 원심분리하고 상층액 제거, 2-3회 반복  

3) EzProteoLysis Native 용액 1 ml을 첨가하고 4℃에서 15분 동안 반응

4) 14,000xg에서 5-15분 간 원심분리 후 상층액 (단백질 추출)을 회수, 1차 보관: 4℃ / 장기 보관: -80℃ 

■ 엽록체

1) 엽록체를 분리 (본 kit에는 포함되어 있지 않음)

2) 엽록체를 e-tube로 회수  

3) EzProteoLysis Native 용액 1 ml을 넣고, 얼음 또는 4℃에서 15분 간 방치

4) 14,000xg에서 5-15분 간 원심분리 후 상층액 (단백질 추출)을 회수, 1차 보관: 4℃ / 장기 보관: -80℃

■ 조직

1) 조직 (약 100 mg)에 cold-PBS를 첨가하여 세척

2) EzProteoLysis Native 용액 1 ml을 넣고, 해부용 가위로 잘게 절단 

3) Homogenizer로 균질화한 뒤, 얼음 또는 4℃에서 15분 간 방치; 2-3분 간격으로 가볍게 뒤집어 혼합 

4) 14,000xg에서 5-15분 간 원심분리 후 상층액 (단백질 추출)을 회수, 1차 보관: 4℃ / 장기 보관: -80℃ 




Sample Preparation Reagent - EzApply Native


▶ Native PAGE용 샘플 조제 시약

▶ 샘플의 1/10만 첨가하면 간단히 사용 가능

▶ 10X 용액 (냉장 보관)

▶ CBB 포함 시약


▶ EzApply Native 사용법

1) EzProteoLysis Native 등으로 추출한 샘플 용액에 EzApply Native를 1/10 비율로 첨가하고 잘 혼합하여 전기영동용 샘플을 준비 

   예) 샘플 용액 : EzApply Native = 9 ul : 10 ul -> 총 10 ul

2) 준비한 샘플을 전기영동 gel에 loading

3) 전기영동 후 CBB 염색 등으로 단백질을 검출



Molecular Weight Marker - EzStandard Native


▶ 각종 Native PAGE용 분자량 마커

▶ 20 ~ 1,236 kDa, 9개의 밴드, Unstained

▶ Ready-to-use, 해동 후 바로 사용 가능

▶ CBB 염색, silver 염색 등 다양한 방법으로 검출 가능


▶ EzStandard Native 사용법

1) EzStandard Native를 실온에서 해동 (※ 절대 가열하지 마세요!)

2) 전기영동 gel 1 lane 당 5 ul를 loading

3) 전기영동 후 CBB 염색 등으로 단백질을 검출



High-Resolution-Clear-Native Buffer - EzRun ClearNative

▶ HR-Clear-Native PAGE용 전기영동 buffer (5X)

▶ 전용 gel 불필요, Laemmli gel 및 Tris-Gly 계열 gel 사용 가능

▶ 음이온 계면활성제로 단백질에 음전하 복합체 형성 

▶ CBB 미포함, 효소활성 및 단백질 기능 유지

▶ 음극용과 양극용 buffer 2종 포함

※ Not compatible with Bis-Tris gels, Tris-Tricine gels, or similar types.

 

▶ EzRun ClearNative 사용법

1) EzRun ClearNative를 증류수로 5배 희석 (※ 전기영동 장치에 따라 음극용/양극용 필요한 양을 준비)

2) 전기영동 장치에 gel을 장착 후, 하부 (양극)에는 양극용 buffer를, 상부 (음극)에는 음극용 buffer를 넣음

3) Gel에 샘플을 loading하고 전기영동을 실행 (※ 샘플 준비 시 EzApply Native 사용) 

※ 전기영동 조건 예시 (Mini slab 기준)

- 정전류: 20 mA/gel, 70-80분

- 정전압: 150V, 85-90분



Native Buffer - EzRun BlueNative


▶ Blue-Native PAGE용 전기영동 buffer (10X)

▶ 전용 gel 불필요, Laemmli gel 및 Tris-Gly 계열 gel 사용 가능

▶ CBB로 단백질에 음전하 복합체 형성 

▶ 양극·음극 공용 buffer + 음극 buffer용 첨가 용액으로 구성

※ Not compatible with Bis-Tris gels, Tris-Tricine gels, or similar types.


▶ EzRun BlueNative 사용법

1) EzRun BlueNative를 증류수로 10배 희석 (※ 전기영동 장치에 따라 음극용/양극용 필요한 양을 준비)

2) 전기영동기에 gel을 장착 후, 하부 (양극)에는 양극용 buffer를, 상부 (음극)에는 음극용 buffer를 넣음

3) Gel에 샘플을 loading하고 음극 buffer에 음극 buffer용 첨가 용액을 1/100 비율로 추가 (※ 샘플 준비 시 EzApply Native 사용)

4) 전기영동을 실행

※ 전기영동 조건 예시 (Mini slab 기준)

- 정전압: 150V, 85-90분


Ordering information

Cat no.Product nameComponents
적용 가능한 Native PAGE
HR-Clear-Native PAGEBlue-Native PAGENative
PAGE
2332319EzProteoLysis NativeEzProteoLysis Native (1X): 30 ml
Protease Inhibitor (100X): 300 ul
Phosphatase Inhibitor (100X): 300 ul
OOO
2332317EzApply NativeEzApply Native (10X): 40 ml
O
O
O
2332344EzStandard NativeEzStandard Native (1X): 100 ul x 5 vials
OOO
2332313EzRun ClearNativeCathode Buffer (-) (5X): 500 ml
Anode Buffer (+) (5X): 500 ml
OXX
2332315EzRun BlueNativeEzRun BlueNative (10X): 500 ml
Additive Solution for Cathode Buffer  (100X): 25 ml
XOX
2332308EzBlueNative AdditiveCoomassie brilliant Blue
Additive Solution for Cathode Buffer (100X): 25 ml
XOO
2332306EzRun MOPS non-SDSTris, MOPS, EDTA (20X): 250 mlXOO
2332323EzRun TGTris, Glycine (10X): 500 mlXOO
2332370EzStain AQuaCoomassie brilliant Blue (RTU): 1 L
OOO

 

제품 문의: (주)다윈바이오텍

Tel. 031-728-3233   E-mail. technical@dawinbio.com

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